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VitroGel 水凝膠的多種 3D 細胞培養方法和應用

更新時間:2023-04-25      點擊次數:1357

使用 VITROGEL 水凝膠的多種細胞培養方法

XENO-FREE 生物功能 VitroGel 水凝膠系統適用于許多 3D 細胞培養和應用。選擇“即用型"水凝膠系統以優化配方和簡化操作流程,或選擇高濃度水凝膠系統,通過“混合搭配"和調整水凝膠來創建定制的微環境。有多種方法可以使用我們的水凝膠系統來滿足許多研究需求。為了展示我們水凝膠的靈活性,我們列出了五種流行的可以使用我們的水凝膠進行的細胞培養方法:3D 細胞培養、2D 水凝膠涂層、靜態懸浮培養、水凝膠細胞珠和作為可注射載體。這五種培養方法適用于我們所有的即用型 VitroGel 和高濃度 VitroGel 系統。用這些方法培養的細胞可以很容易地用用于下游分析或傳代培養的VitroGel® 細胞回收溶液。

3D 細胞培養

VitroGel 系統是 3D 細胞培養的理想選擇。只需在室溫下將 VitroGel 溶液與細胞懸液混合,轉移到培養板并添加頂部培養基,細胞就可以進行孵育了。這種 3D 培養方法進行了完整的細胞封裝,從而增強了細胞-水凝膠基質的相互作用。許多下游分析,如藥物篩選、免疫熒光分析和細胞毒性測定,可以直接在水凝膠中進行。

二維水凝膠涂層

2D 水凝膠涂層方法是在傳統 2D 培養和 3D 細胞封裝培養之間架起橋梁。通過在室溫下將 VitroGel 溶液與細胞培養基混合并轉移到培養板中,VitroGel 可以在培養板底部涂上一層厚厚的水凝膠。細胞可以直接添加到水凝膠的頂部。二維水凝膠涂層方法允許細胞與功能性水凝膠物質相互作用/浸入功能性水凝膠物質中,并保持表面暴露于頂部介質。當細胞在水凝膠表面遷移/聚集時,可能會快速形成細胞球體。2D 水凝膠涂層方法可用作與 3D 細胞培養方法相結合的替代共培養方法:將一種細胞類型封裝在水凝膠中用于 3D 培養,然后在水凝膠頂部添加另一種類型的細胞作為 2D 涂層培養。二維涂層 VitroGel 也可以成為研究細胞侵襲、血管生成測定和逐層共培養的強大系統。除了 2D 厚凝膠涂層外,VitroGel 還可以稀釋用于薄凝膠涂層方法。

靜態懸浮文化

3D 靜態懸浮培養方案是 VitroGel 水凝膠系統的培養方法。通過簡單地將 VitroGel 溶液和細胞混合形成軟水凝膠,研究人員可以進一步直接將水凝膠-細胞混合物與額外的培養基混合,制成水凝膠-細胞懸浮液。水凝膠基質分散在細胞培養基中可以增加整個混合物的粘度,幫助細胞在沒有強烈攪拌的情況下保持懸浮狀態。3D 靜態懸浮培養易于制備,可靈活調整各種細胞類型和接種密度的最終粘度,只需改變水凝膠和細胞培養基的混合比例即可。例如,研究人員可以使用固定的2:1(水凝膠溶液:細胞,v/v)配制水凝膠-細胞混合物,然后將其與細胞培養基按1:1至1:10的比例混合,得到不同粘度的最終的水凝膠細胞懸液。這種培養方法可以很容易地用于實驗室規模或大型工業規模的細胞培養放大。研究實驗室不需要花哨的生物反應器或昂貴的培養容器。我們將其用于干細胞球體HEK293 球體的生成。該方法也適用于我們所有的即用型 VitroGel 和高濃度 VitroGel 系統。VitroGel 靜態懸浮培養產生的細胞可通過離心輕松收集。

水凝膠細胞珠

作為一種可注射的水凝膠系統,VitroGel 具有剪切稀化和快速恢復流變特性。水凝膠溶液可以與細胞混合形成軟水凝膠,然后可以將其作為液滴添加到細胞培養基中,形成水凝膠細胞珠。這種培養方法不僅將細胞封裝在水凝膠基質中以增強細胞-基質相互作用,而且還允許整個水凝膠-細胞珠懸浮在細胞培養基中以實現最佳培養基滲透。研究人員可以通過改變添加到培養基中的液滴體積來調整水凝膠珠的大小。對于需要牢固附著才能生長的細胞,例如間充質干細胞 (MSC),這種水凝膠細胞珠培養方法是替代微載體進行 3D 細胞放大的方法。由于優良的介質和氧氣滲透性,在水凝膠珠中培養的細胞可以保持長期培養的高細胞活力。該方法適用于我們所有的即用型 VitroGel 和高濃度 VitroGel 系統。VitroGel 水凝膠細胞珠培養產生的細胞可以通過 VitroGel 細胞回收溶液收集。

注射載體

VitroGel 是一種出色的動物注射載體。在通過注射器注射等機械剪切力作用下,水凝膠發生凝膠-溶膠轉變,成為自由流動狀態。然而,一旦剪切力停止,水凝膠的機械強度可以迅速恢復,并發生溶膠-凝膠轉變,再次成為水凝膠狀態。憑借這種可注射特性,VitroGel 可用于 細胞治療的體內細胞/藥物遞送或控釋。只需在室溫下將水凝膠溶液與細胞/化合物混合,水凝膠即可在 20 分鐘內用于注射。除了即用型 VitroGel,研究人員還可以使用 VitroGel 高濃度水凝膠來獲得不同水凝膠強度的可注射水凝膠。


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